Latar Belakang: Pemberian ASI eksklusif memiliki peran penting bagi kesehatan dan pertumbuhan bayi, namun pencapaiannya masih belum sesuai dengan target yang ditetapkan. Di Kota Yogyakarta, cakupan ASI eksklusif tergolong masih rendah, terutama di wilayah Puskesmas Ngampilan yang menjadi perhatian khusus. Rendahnya tingkat pengetahuan serta kesibukan ibu bekerja menjadi faktor utama yang berpengaruh terhadap praktik pemberian ASI eksklusif. Melalui penelitian ini, diharapkan dapat tergambar kondisi tingkat pengetahuan dan karakteristik ibu sebagai landasan dalam upaya meningkatkan keberhasilan ASI eksklusif di wilayah tersebut. Tujuan: Mengetahui gambaran tingkat pengetahuan dan karakteristik Ibu dalam praktik pemberian ASI ekslusif di Puskesmas Ngampilan Kota Yogyakarta. Metode: Penelitian ini bersifat deskriptif kuantitatif dengan pendekatan crosssectional. Pengambilan data dilakukan pada bulan Juni 2025 di Puskesmas Ngampilan. Sampel sebanyak 36 ibu menyusui dengan teknik consecutive sampling. Data dikumpulkan menggunakan kuisioner tertutup dan dianalisis secara deskriptif. Hasil: Sebanyak 72,2% responden berusia 20-35 tahun, 61,1% responden memiliki pengetahuan cukup, 50,0% responden tingkat pendidikan SD/SMP memiliki pengetahuan kurang. Sebanyak 40,0% responden status bekerja tidak melakukan praktik pemberian ASI ekslusif, disisi lain sebanyak 100% responden tingkat pengetahuan baik melakukan praktik pemberian ASI Ekslusif. Kesimpulan: Sebagian besar responden memiliki usia reproduktif, tingkat pengetahuan cukup mengenai ASI Ekslusif, dan melakukan praktik pemberian ASI Ekslusif. Namun masih ditemukan tingkat pengetahuan kurang, serta tidak melakukan praktik pemberian ASI Ekslusif, hal ini ditinjau berdasarkan usia, tingkat pendidikan, dan status pekerjaan. Kata kunci: Pengetahuan, karakteristik ibu, ASI Ekslusif, Yogyakarta.