Latar Belakang: Tourniquet merupakan alat bantu dalam flebotomi. Penggunaan tourniquet dalam flebotomi seringkali terjadi kesalahan pada lama pemasangannya. Durasi pemasangan tourniquet paling lama di bagian sampling rata-rata adalah 2 menit. Pemasangan tourniquet dalam flebotomi tidak boleh melebihi 1 menit karena dapat menghasilkan hemokonsentrasi pada vena yang akan dilakukan penusukan. Hemokonsentrasi akan mengakibatkan peningkatan palsu pada beberapa parameter hasil pemeriksaan. Salah satu parameter yang meningkat palsu adalah kadar protein total. Tujuan Penelitian: Mengetahui perbedaan kadar protein total pada lama pemasangan tourniquet selama 1 menit dan 2 menit. Metode Penelitian: Jenis Penelitian adalah observasional analitik. dengan desain penelitian cross sectional. Subjek yang digunakan sebanyak 20 responden. Data yang diperoleh kemudian dianalisis secara deskriptif, dan statistik dengan uji beda 2 sampel berpasangan. Hasil Penelitian: Hasil penelitian menunjukkan bahwa rata-rata hasil pemeriksan kadar protein total pada lama pemasangan tourniquet selama 1 menit dan 2 menit yaitu 7,53 g/dL dan 7,92 mg/dL. Hasil ini dianalisis secara deskriptif menunjukkan peningkatan rata-rata kadar protein total pada pemanjangan durasi pemasangan tourniquet. Kesimpulan: Hasil uji Paired Sample T-Test didapatkan ada perbedaan yang bermakna kadar protein total pada lama pemasangan tourniquet selama 1 menit dan 2 menit (p =0,003). Kata Kunci: protein total, hemokonsentrasi, lama pemasangan tourniquet