Latar Belakang: Lactate dehydrogenase (LDH) merupakan enzim penting dalam pemeriksaan kimia klinik yang hasilnya dapat dipengaruhi faktor pra analitik, khususnya hemolisis dan jenis sampel darah yang digunakan. Kesalahan pada tahap pra analitik dapat mempengaruhi akurasi hasil pemeriksaan laboratorium, sehingga penting untuk mengetahui pengaruh jenis sampel terhadap kadar LDH. Tujuan: Mengetahui perbedaan kadar LDH yang diperiksa menggunakan plasma EDTA, plasma heparin dan serum. Metode: Penelitian ini merupakan penelitian observasional analitik dengan desain potong lintang (cross sectional) yang melibatkan 30 sampel yang didapatkan dari mahasiswa semester IV jurusan Teknologi Laboratorium Medis Poltekkes Kemenkes Yogyakarta. Pemeriksaan kadar LDH dilakukan dengan metode fotometrik menggunakan alat kimia analyzer, dan data dianalisis secara statistik menggunakan uji One Way Anova. Hasil: Rata – rata kadar LDH pada plasma EDTA sebesar 241,23 U/L, plasma heparin sebesar 250,23 U/L dan serum sebesar 245,57 U/L. Hasil uji statistik menunjukkan tidak terdapat perbedaan yang signifikan di antara ketiga jenis sampel (p = 0,732). Kesimpulan: Tidak terdapat perbedaan kadar LDH yang signifikan secara statistik antara sampel plasma EDTA, plasma heparin, dan serum. Ketiga jenis sampel dapat digunakan untuk pemeriksaan kadar LDH apabila penanganannya dilakukan dengan benar. Kata kunci: Lactate dehydrogenase (LDH), plasma EDTA, plasma heparin, serum.