Latar Belakang : Efusi pleura adalah penimbunan cairan berlebihan di dalam rongga pleura yang disebabkan oleh ketidakseimbangan antara pembentukan dan pengeluaran cairan pleura. Pemeriksaan jumlah sel darah putih (leukosit) dalam cairan tubuh sangat penting untuk mendeteksi tanda-tanda cedera organ atau infeksi. Metode manual seperti Improved Neubauer umum digunakan tetapi memiliki keterbatasan seperti membutuhkan banyak tenaga, waktu, dan ketidaktepatan. Metode otomatis seperti Sysmex UF-5000 menawarkan alternatif dengan keunggulan efisiensi dan konsistensi. Tujuan : Mengetahui perbedaan, rerata dan persentase selisih jumlah leukosit cairan pleura yang dihitung menggunakan metode otomatis Sysmex UF-5000 dan metode manual bilik hitung Improved Neubauer. Metode : Penelitian ini menggunakan desain observasional analitik dengan pendekatan cross sectional. Populasi pada penelitian ini adalah sampel cairan pleura di Instalasi Laboratorium Terpadu RSUP dr. Sardjito Yogyakarta. Jumlah sampel yang digunakan sebanyak 30 sampel. Data yang diperoleh dianalisis secara deskriptif dan uji statistik Independent-Samples T Test yaitu Mann Whitney U. Hasil : Rerata jumlah leukosit cairan pleeura dengan metode otomatis sebesar 947sel/μL sedangkan jumlah leukosit cairan pleeura dengan metode manual sebesar 930sel/μL dengan selisih rerata 17 sel/μL setara 1.81%. Hasil uji Mann Whitney U didapat nilai sig 0.882. Kesimpulan : Tidak terdapat perbedaan yang signifikan secara statistik antara hasil pemeriksaan jumlah leukosit cairan pleura menggunakan metode otomatis Sysmex UF-5000 dan metode manual bilik hitung Improved Neubauer. Kata Kunci : pleura, jumlah leukosit, metode otomatis, metode manual