Latar Belakang : Penyimpanan serum pasien gagal ginjal kronik dilakukan karena dikhawatirkan adanya permintaan pemeriksaan tambahan oleh dokter, salah satunya pemeriksaan bilirubin total. Serum pasien gagal ginjal kronik pre hemodialisa terdapat Subtansi toxin yaitu Guanidine dimana guanidine merupakan denaturant yang menghasilkan efek denaturasi yang kuat. Tujuan Penelitian : Mengetahui pengaruh kadar bilirubin total pada serum pasien gagal ginjal kronik yang diperiksa segera, setelah disimpan selama 4 jam dan 8 jam pada suhu 20 - 25°C. Metode Penelitian : Pemeriksaan kadar bilirubin total pada serum pasien gagal ginjal kronik yang disimpan selama 4 dan 8 jam pada suhu 20-25 ˚C. Serum dibagi menjadi 3 perlakuan yaitu pemeriksaan segera, 4 jam dan 8 jam. Jenis penelitian yang digunakan adalah pra eksperimen dengan desain penelitian one group pretest posttest. Penelitian dilakukan di RSUD Sleman Yogyakarta pada bulan November dengan jumlah sampel sebanyak 40 sampel. Kriteria inklusi yang digunakan antara lain responden menderita gagal ginjal kronik stadium lima, sampel tidak hemolisis, ikterik dan lipemik, HbsAg dan anti HCV negatif, serta dilakukan sebelum pasien menjalani hemodialisa. Data yang diuji menggunakan Repeated Measure ANOVA, lalu dilakukan uji normalitas data selanjutnya hasil non parametrik diuji menggunakan uji Friedman. Untuk mengetahui hasil signifikan antar waktu dilakukan uji post hoc Wilxocon. Hasil Penelitian : didapatkan rerata kadar bilirubin total pada pasien Gagal ginjal kronik yang diperiksa pada suhu 20-25 ˚C selama 0 jam (pemeriksaan segera), 4 jam dan 8 jam berturut-turut sebesar 0,411 mg/dl, 0,377 mg/dl, dan 0,362 mg/dl. Kesimpulan : Hasil penelitian didapatkan adanya pengaruh lama penyimpanan serum pasien Gagal ginjal kronik pada suhu 20-25 ˚C terhadap kadar Bilirubin total ditunjukkan dengan nilai sig>0,005. Kata Kunci : gagal ginjal kronik, guanidine, bilirubin total