Latar Belakang: Laboratorium memiliki peran penting dalam upaya pelayanan kesehatan. Faktor praanalitik dalam laboratorium memiliki tingkat kesalahan yang tinggi dibandingkan dengan faktor analitik dan pascaanalitik. Salah satu faktor praanalitik tersebut adalah pembendungan vena. Pemasangan tourniquet atau pembendungan vena yang terlalu lama dapat memengaruhi temuan dalam pemeriksaan laboratorium salah satunya adalah pemeriksaan magnesium. Tujuan: Mengetahui perbedaan kadar magnesium pada pembendungan vena selama 1 dan 2 menit. Metode Penelitian: Jenis penelitian ini adalah Analitic Observasional dengan desain penelitian Cross Sectional. Sampel yang digunakan adalah sampel serum dengan total responden 15 orang. Pungsi vena dilakukan sebanyak dua kali pada masing-masing responden pada lengan yang berbeda dengan waktu pembendungan yang berbeda. Data primer yang diperoleh kemudian dianalisis secara statistik dengan uji distribusi data dan uji t dua sampel berpasangan. Hasil Penelitian: Hasil penelitian menunjukkan rata-rata kadar magnesium dengan waktu pembendungan vena selama 1 menit adalah 1,94 mg/dL. Sedangkan rata-rata kadar magnesium pada pembendungan vena selama 2 menit adalah 2,07 mg/dL. Hasil analisis statistik menunjukkan terdapat perbedaan kadar magnesium yang diperiksa pada pembendungan vena selama 1 dan 2 menit. Perbedaan tersebut sebesar 6,72%, menurut CLSI hasil tersebut masih diperbolehkan karena maksimal perbedaan kadar pada magneisum sebesar 25%. Kesimpulan: Terdapat perbedaan yang signifikan kadar magnesium pada pembendungan vena selama 1 dan 2 menit. Kata kunci: Kadar magnesium, waktu pembendungan, vena.