Latar Belakang: Pemeriksaan Thrombin Time (TT) adalah pemeriksaan penyaring hemostasis yang mencerminkan perubahan fibrinogen menjadi fibrin setelah penambahan reagen trombin. Tahap praanalitik memberikan kontribusi terbesar terhadap mutu hasil pemeriksaan TT. Pengumpulan spesimen termasuk tahap penting dalam praanalitik. Peningkatan lama pemasangan tourniquet dapat menyebabkan gangguan dalam pemeriksaan karena terjadi hemokonsentrasi yang akan memperpendek nilai TT. Tujuan Penelitian: Untuk mengetahui apakah terdapat perbedaan nilai TT pada pengambilan darah vena dengan lama pemasangan tourniquet selama 1 menit dan 3 menit. Metode Penelitian: Jenis penelitian ini adalah penelitian survei analitik dengan desain penelitian cross sectional. Sampel diperoleh menggunakan teknik simple random sampling sebanyak 17 sampel dan terdiri dari 2 kelompok uji. Rancangan penelitian ini berupa pemeriksaan nilai TT pada pengambilan darah sistem vacutainer dengan lama pemasangan tourniquet selama 1 menit dan 3 menit. Data yang diperoleh dianalisis secara deskriptif dan statistik menggunakan uji Wilcoxon. Hasil Penelitian: Hasil penelitian ini menunjukkan rerata nilai TT pada pengambilan darah vena dengan lama pemasangan tourniquet selama 1 menit dan 3 menit yaitu sebesar 13,10 detik dan 12,47 detik. Analisis statistik menunjukkan nilai signifikansi p = 0,006, artinya ada pebedaan nilai TT pada pengambilan darah vena dengan lama pemasangan tourniquet selama 1 menit dan 3 menit. Lama pemasangan tourniquet selama 3 menit tidak menyebabkan perubahan interpretasi secara klinis pada plasma sitrat yang tidak memiliki gangguan faktor koagulasi karena persentase pemendekan nilai TT yang terjadi <10%. Kesimpulan: Ada perbedaan nilai Thrombin Time (TT) yang diperoleh dari pengambilan darah vena dengan lama pemasangan tourniquet selama 1 menit dan 3 menit. Persentase pemendekan nilai TT <10% dan tidak menyebabkan perubahan interpretasi secara klinis. Kata Kunci: Thrombin Time (TT), lama pemasangan tourniquet, Natrium Sitrat, Pengambilan Darah.