Latar Belakang: Pemeriksaan Plasma Prothrombin Time (PPT) merupakan pemeriksaan hemostasis untuk pasien preoperasi. Hasil pemeriksaan PPT dipengaruhi oleh faktor praanalitik seperti perbandingan volume darah dan antikoagulan natrium sitrat 0,109 M yang tidak tepat. Penurunan perbandingan volume darah dan antikoagulan natrium sitrat menyebabkan antikoagulan natrium sitrat dalam plasma berlebih sehingga mengikat kalsium dalam reagen pemeriksaan PPT yang menyebabkan terhambatnya aktivasi faktor VII dan koagulasi darah jalur ekstrinsik terhambat. Hal tersebut menyebabkan memanjangnya hasil pemeriksaan PPT. Tujuan Penelitian: Mengetahui pengaruh variasi perbandingan volume darah dan antikoagulan natrium sitrat 0,109 M terhadap hasil pemeriksaan PPT. Metode Penelitian: Jenis penelitian ini adalah True Experiment dengan rancangan Post Test Only Control Group Design. Rancangan ini terdapat Kelompok kontrol yaitu perbandingan volume darah dan antikoagulan natrium sitrat 0,109 M 9:1 dan kelompok perlakuan yaitu perbandingan volume darah dan antikoagulan natrium sitrat 0,109 M 8:1, 7:1, 6:1 dan 5:1. Data yang diperoleh dianalisis secara deskriptif dan statistik menggunakan uji One Way Anova. Hasil Penelitian: Persentase pemanjangan hasil pemeriksaan PPT pada perbandingan volume darah dan antikoagulan natrium sitrat 0,109 M 8:1, 7:1, 6:1, dan 5:1 berturut-turut yaitu 2,7%, 5,7%, 14,4% dan 20,9%. Hasil uji One Way Anova didapatkan ada perbedaan pada hasil pemeriksaan PPT dengan variasi perbandingan volume darah dan antikoagulan natrium sitrat 0,109 M. Hasil uji lanjut menunjukkan perbandingan volume darah dan antikoagulan natrium sitrat 0,109 M 7:1 atau setara tabung vacutainer terisi 80% sudah mampu memberikan pengaruh terhadap memanjngnya hasil pemeriksaan PPT. Kesimpulan: Ada perbedaan pada hasil pemeriksaan PPT dengan variasi perbandingan volume darah dan antikoagulan natrium sitrat 0,109 M. Perbandingan volume darah dan antikoagulan natrium sitrat 0,109 M 7:1 atau setara tabung vacutainer terisi 80% sudah mampu memberikan pengaruh terhadap memanjngnya hasil pemeriksaan PPT. Kata Kunci: Perbandingan, volume darah, antikogulan, natrium sitrat, Plasma Prothrombin Time