Latar Belakang: Sampel urine yang dikirim selama lebih dari 30 menit harus dilakukan metode pengawetan yang sesuai untuk mencegah terjadinya proliferasi bakteri yang dapat menyebabkan kerusakan unsur-unsur sel pada sedimen urine. Pengawetan urine dapat dilakukan secara kimia, dengan menambahkan pengawet berupa formalin 37% atau secara fisik dengan melakukan pendinginan sampel pada suhu 2-8˚C. Tujuan: Mengetahui perbedaan jumlah eritrosit dan leukosit pada urine yang diawetkan dengan formalin 37% pada suhu kamar dan didinginkan pada suhu 2-8˚C tanpa penambahan pengawet. Metode: Penelitian ini merupakan penelitian pra eksperimen dengan desain one group pretest and posttest, dilakukan dengan menghitung jumlah eritrosit dan leukosit pada sedimen urine yang langsung diperiksa, ditambahkan formalin 37% dan disimpan pada suhu kamar serta didinginkan pada suhu 2-8˚C tanpa penambahan pengawet. Hasil: Hasil penelitian menunjukkan selisih rerata antara kelompok sampel yang ditambahkan formalin 37% dan disimpan pada suhu kamar dengan kelompok sampel yang langsung diperiksa adalah 0,77 sel/LPB dengan persentase 1,82% pada parameter eritrosit dan 0,10 sel/LPB dengan persentase 0,95% pada parameter leukosit, sementara selisih rerata antara kelompok sampel yang didinginkan pada suhu 2-8˚C tanpa penambahan pengawet dengan kelompok sampel yang langsung diperiksa adalah 1,05 sel/LPB dengan persentase 2,47% pada parameter eritrosit dan 0,18 sel/LPB dengan persentase 1,65% pada parameter leukosit. Hasil uji statistik One Way ANOVA menujukkan signifikansi 0,000 pada parameter eritrosit dan 0,049 pada parameter leukosit. Kesimpulan: Ada perbedaan jumlah eritrosit dan leukosit pada urine yang diawetkan dengan formalin 37% pada suhu kamar dan didinginkan pada suhu 2-8˚C tanpa penambahan pengawet. Kata Kunci: Sedimen urine, eritrosit, leukosit, pengawetan urine, mikroskopis manual.