Latar Belakang: Kanker serviks merupakan salah satu penyebab kematian tertinggi pada wanita akibat infeksi Human Papilloma Virus (HPV). Secara global terdapat sekitar 660.000 kasus baru dan 350.000 kematian pada tahun 2022. Upaya pencegahan kanker serviks dapat dilakukan melalui vaksinasi HPV yang efektif menurunkan risiko penyakit. Namun, cakupan vaksinasi masih rendah, dipengaruhi oleh kurangnya pengetahuan remaja Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui tingkat pengetahuan siswi tentang Vaksin Human Papilloma Virus (HPV) di kelas XI SMA Negeri 1 Mlati. Metode: Penelitian ini adalah deskriptif dengan desain cross sectional. Subjek penelitian ini adalah seluruh siswi kelas XI di SMA Negeri 1 Mlati sebanyak 99 siswi. Pengumpulan data dilakukan menggunakan kuesioner. Data dianalisis secara deskriptif dan disajikan dalam tabel distribusi frekuensi. Hasil Penelitian: Responden memiliki pengetahuan cukup sebesar (49,5%), pendidikan terakhir ibu pada jenjang SMA/SMK sebesar (63,6%), tidak memiliki riwayat kanker serviks di keluarga sebesar (97,0%), memiliki dukungan keluarga sebesar (94,9%), memiliki pengalaman mendapat informasi sebesar (54,5%), ragam sumber informasi yang tidak bervariasi sebesar (53,3%), tidak memiliki riwayat Vaksin HPV sebelumnya sebesar (88,9%). Pada aspek tingkat pengetahuan, responden dalam kategori kurang pada aspek efek samping sebesar (38,4%). Kesimpulan: Tingkat pengetahuan siswi kelas XI SMA Negeri 1 Mlati tentang Vaksin Human Papilloma Virus (HPV) hampir setengahnya berada pada kategori cukup.