Kesulitan pengambilan sampel darah pasien sering terjadi pada bayi dan balita. Menyebabkan volume darah tidak mencukupi dan juga dapat menyebabkan perbandingan antikoagulan dan darah menjadi tidak tepat, sehingga dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan yang diinginkan. Mengetahui adanya pengaruh berbagai variasi volume sampel darah dalam tabung vacutainer antikoagulan K3EDTA terhadap hasil pemeriksaan. jumlah trombosit di RSUD Besemah Kota Pagar Alam Sumatera Selatan. Jenis penelitian ini adalah observasional dengan desain penelitian Cross-sectional. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Desember 2022. Jumlah responden sebanyak 5 orang yang di ambil darah vena sebanyak 10,5 ml lalu di masukkan kedalam 6 tabung K3EDTA masing-masing tabung diisi 0,5 ml, 1,0 ml, 1,5 ml, 2,0 ml, 2,5 ml dan 3,0 ml. Kemudian diperiksa jumlah trombosit masing-masing 5 kali pengulangan menggunakan alat Hematologi Analizer Sysmex XN-350. Kemudian dinalisis statistik menggunakan Non Parametric uji Friedman (K Related Sampel). Rerata jumlah trombosit dalam sampel darah berbagai volume 0,5-1,0-1,5-2,0-2,5-3,0 ml adalah 293.720-293.480-304.840-303.080-309.320-318.280/mm3. Hasil penelitian menunjukkan ada pengaruh signifikan/bermakna perlakuan berbagai variasi volume sampel darah terhadap hasil pemeriksaan jumlah trombosit (0,000 < 0,05). Ada pengaruh berbagai volume sampel darah dalam tabung vacutainer antikoagulan K3EDTA terhadap hasil pemeriksaan jumlah trombosit, semakin bertambah banyak volume sampel darah makin meningkat hasil pemeriksaan jumlah trombosit.